2013公共营养师二级食品分析：糖精钠的测定[页4]

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(5)标准曲线绘制

吸取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml糖精钠标准液A，分别置于100ml容量瓶中，各以2%碳酸氢钠溶液定容，于270nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。

(6)样品测定

将经薄层分离的样品离心液及试剂空白液于270nm处测定吸光度，从标准曲线上查出相应浓度。结果计算如下：

糖精钠(g/Kg或g/l)=((C1-C0)*V1*V3)/(W*V2)

式中：C1：测定用样液中糖精钠含量mg/ml。

C0：空白液中糖精钠含量mg/ml

V1：溶解样品残留物加入乙醇的体积ml。

V2：点样用样品乙醇溶液的体积ml。

V3：溶解刮下的糖精钠时所用2%碳酸氢钠溶液体积ml。

W：样品残留物相当的原样品重量g或ml。

4.注意事项

(1)样品提取时加入CuSO4及NaOH用于沉淀蛋白质，防止用乙醚萃取发生乳化，其用量可根据样品情况按比例增减。

(2)样品处理液酸化的目的是使糖精钠转化成糖精，以便用乙醚提取，因为糖精易溶于乙醚，而糖精钠难溶于乙醚。

(3)富含脂肪的样品，为防止用乙醚萃取糖精时发生乳化，可先在碱性条件下用乙醚萃取脂肪，然后酸化，再用乙醚提取糖精。

(4)对含CO2的饮料，应除CO2，否则将影响样液的体积。

(5)聚酰胺薄层板，烘干温度不能高于80℃，否则聚酰胺变色。

(6)在薄层板上的点样量，应估计其中糖精含量在0.1-0.5mg。

二.纳氏比色法

1.原理

糖精钠在酸性溶液中经有机溶剂萃取，经过消化变成铵盐，与纳氏试剂作用生成一种黄色物质，根据颜色的深浅与标准比较定量，反应式如下：

2K2[HgI4]+4KOH+NH4+→NH2Hg2OI+7KI+3H2O+K+

2.试剂

(1)硫酸溶液(V/V)。

(2)纳氏试剂：

(3)硫酸铵标准溶液

3.操作方法

(1)样品中糖精钠的提取：

1)含有二氧化碳的液体样品

2)含有酒精的液体样品

3)乳及乳制品

4)含蛋白质、脂肪、淀粉的样品

(2)样品消化及分析

(3)标准曲线的绘制：准确吸取标准硫酸铵溶液0.0、.0.2、0.4、0.6、0.8、1.0毫升，分别置于25ml纳氏比色管中，各加 15ml无氨蒸馏水，再加纳氏试剂5ml，加水至刻度摇匀。静置10分钟，以2cm比色杯置分光光度计430nm处测定吸光度，根据结果绘制标准曲线：

4.注意事项

(1)测定溶液中凡能引起浑浊的物质，可用酒石酸钾钠掩蔽。

(2)样品经消化后，及时进行测定

(3)样品酸化处理，目的是将糖精钠转化为糖精，以便用乙醚提取

(4)对富含脂肪的样品，可先在碱性条件下用乙醚萃取脂肪，然后酸化，再用乙醚提取糖精

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